Merkblatt Bakteriologie

Um ein aussagekräftiges Ergebnis bei der bakteriologischen und mykologische Untersuchung zu bekommen, sind eine adäquate Probenentnahme und Versand wichtig.
Die Entnahme der Proben sollte so erfolgen, dass keine Kontamination mit der physiologischen Flora erfolgt. Angaben zur Tierart oder Lokalisation sind wichtig, da unter Umständen zusätzliche spezielle Agarplatten für die Anzüchtung von bestimmten Bakterienarten verwendet werden. Außerdem sind diese Angaben wichtig, um das richtige Antibiogramm zu wählen, und für die Auswertung des Resistenztestes nach CLSI.

Abstriche

• Für die kulturelle Anzüchtung werden Abstriche mit Transportmedium benötigt. Für schwer anzüchtbare Bakterien ist ein Transportmedium mit Kohlezusatz zu bevorzugen (z.B. Taylorella equigenitalis).
• Erfolgt der bakterielle Nachweis nicht durch eine Kultur sondern mittels PCR, so wird ein Tupfer ohne Transportmedium benötigt (z.B. Chlamydien, Mykoplasmen).
• Für manche Erreger besteht die Möglichkeit des Nachweises mittels Kultur oder PCR. Je nach gewünschter Methode muss dann der entsprechende Tupfer geschickt werden (z.B. Taylorella equigentialis, Streptococcus equi equi, Rhodococcus equi, Bordetellen).
• Lagerung und Transport: bei Raumtemperatur, für PCR-Tests ist eine Lagerung im Kühlschrank möglich.
• Besonderheiten
  ⇒ Abszesse: Der kulturelle Nachweis ist schwierig, da vorgeschädigte oder phagozytierte Keime nicht anwachsen. Am besten ist die Abszesskapsel abzutupfern. Empfehlenswert ist zusätzlich die Untersuchung auf Anaerobier, die extra angefordert werden müssen.
  ⇒ Taylorella equigenitalis (CEM): Für die kulturelle Anzüchtung benötigen wir einen Abstrich in Transportmedium mit Kohle. Der Versand sollte gekühlt aber nicht gefroren erfolgen (Kühlakkus in Zellstoff einpacken). Nach EU Richtlinie 92/65/EWG ist auch für den PCR-Nachweis ein Abstrich in Transportmedium erforderlich.

Flüssigkeiten

• Flüssigkeiten aus sterilen Lokalisationen (z.B. Gelenk, Liquor cerebrospinalis, Bauchhöhle) am besten bei Raumtemperatur lagern, nicht sterile Flüssigkeiten gekühlt lagern.
  • Für die kulturelle Untersuchung sollte die meist geringe Menge eines Punktates mit einem Tupfer mit Transportmedium aufgenommen werden.
    Größere Mengen können in einem sterilen Röhrchen eingesendet werden. Für PCR-Tests werden mind. 0,2 ml Flüssigkeit benötigt.
• Punktate, Sekrete, Bronchoalveolarlavage
  ⇒ Kleine Mengen als Abstrich einschicken (je nach Testverfahren mit oder ohne Transportmedium), größere Mengen können in einem sterilen Röhrchen eingesendet werden.
  ⇒ Die Untersuchung auf Actinomyceten und Nocardien muß extra angefordert werden, da hierfür andere Kulturbedingungen erforderlich sind.

• Harn
  ⇒ Für die Gewinnung von Harn ist die Zystozenthese zu bevorzugen. Weitere Möglichkeiten sind die Entnahme über sterilen Katheter oder Gewinnung des Mittelstrahlharnes.
  ⇒ Der Harn kann in einem sterilen Röhrchen oder als Urikult verschickt werden. Ebenfalls ist die Einsendung eines Tupfers mit Transportmedium möglichmöglich, allerdings kann dann nur eine semiquantitative Angabe der Keimzahl erfolgen.

Haare, Krusten für Dermatophytendiagnostik

• Krusten und Haare mit Wurzeln von der Peripherie der Hautveränderung gewinnen.
• Proben in sauberen Papiertüten oder Alufolie einpacken.

Kot

• Für mehrere Untersuchungen bzw. Profile empfiehlt es sich ein mindestens ¾ volles Kotröhrchen einzuschicken.
• Lagerung bei Raumtemperatur, über das Wochenende oder in der heißen Jahreszeit kühlen. Bei Verdacht auf Salmonellen den Kot nicht kühlen.

Blutkultur

• Die Beimpfung der Flaschen, sowie Lagerung und Transport erfolgt bei Raumtemperatur.
• Die Blutentnahme sollte bei einem Fieberschub erfolgen. Die Einsendung von 2-3 Blutkulturflaschensets (aerob und anaerob; Blutentnahme zu unterschiedlichen Zeiten, Abstand mindestens 1 Stunde) ist zu empfehlen.
• Die Untersuchung erfolgt aerob und anaerob.

Hygiene

• Kontrolle Flächendesinfektion
  ⇒ Auf Anforderung werden spezielle Agarplatten zugeschickt. Nach Reinigung und Desinfektion der Oberfläche werden die Platten mit der Agaroberfläche für 1-2 Minuten auf die untersuchende Fläche gelegt.

• Funktionsfähigkeit von Sterilisatoren
  ⇒ Auf Anforderung werden Bioindikatoren zugeschickt. Diese (in der blauen Umverpackung lassen) werden dem zu sterilisierenden Material beigefügt und mitsterilisiert. Die Positivkontrolle darf nicht mitsterilisiert werden.

Versandmaterial

• Tupfer mit und ohne Medium sowie sterile Röhrchen können jederzeit kostenlos angefordert werden.
• Blutkulturflaschen sind kostenpflichtig. Für eine Zusendung benötigen wir eine schriftliche Bestellung
• Die Abklatschplatten und Sterilisationsmaterialien für Hygiene-Untersuchungen werden im Voraus bei Anforderung berechnet, die Auswertung ist im Preis enthalten.

Untersuchungsdauer

• Die Untersuchung auf aerobe Keime dauert in der Regel 2-3 Tage, Anaerobier ca. 1 Woche. PCR Tests haben eine Regellaufzeit von 1 – 3 Arbeitstagen.
• Die mykologische Untersuchung von Abstrichen z.B. vom Ohr dauert 2 – 7 Tage. Die kulturelle Untersuchung von Haaren auf Dermatophyten beinhaltet die Mikroskopie eines Präparates, das Ergebnis erfolgt am Tag des Proben einganges. Die Kulturen werden 2-mal wöchentlich durchgesehen, die meisten Hautpilze wachsen in der ersten Bebrütungswoche. Negative Kulturen werden bis zu 3 Wochen aufbewahrt. Die Dermatophyten-PCR dauert in der Regel 2 – 4 Arbeitstage.
• Taylorella equigenitalis kulturell: Die Bebrütungsdauer beträgt bei Export nach Kanada 14 Tage, ansonsten 7 Tage.

Zusätzliche Kosten

• Die Keimdifferenzierung mittels MALDITOF ist in der bakteriologischen Untersuchung inbegriffen.
• Die serologische Keimdifferenzierung (z.B. Salmonellen), die Erstellung eines Antibiogramms sowie die Bestimmung von multiresistenten Keimen (z.B. MRSA, ESBL) werden extra verrechnet.
• Das Antibiogramm wird pauschal pro Probe berechnet, auch wenn für mehrere daraus isolierte Keime Antibiogramme durchgeführt werden müssen.

07 / 2016, rev. 10/2020